|本期目录/Table of Contents|

[1]李爽,王炜杰,赵伟睿,等.基于层析技术探究金环蛇蛇毒多克隆抗体F(ab′)2的制备工艺[J].浙江理工大学学报,2025,53-54(自科二):276-282.
　LI Shuang,WANG Weijie,ZHAO Weirui,et al.A study on the preparation technology of F(ab′) 2 fragments from polyclonal antibodies against Bungarus fasciatus venoms by chromatography[J].Journal of Zhejiang Sci-Tech University,2025,53-54(自科二):276-282.
点击复制

基于层析技术探究金环蛇蛇毒多克隆抗体F(ab′)2的制备工艺()
分享到：

浙江理工大学学报[ISSN:1673-3851/CN:33-1338/TS]

卷:
第53-54卷
期数:
2025年自科第二期
页码:
276-282
栏目:
出版日期:
2025-03-10

文章信息/Info

Title:
A study on the preparation technology of F(ab′) 2 fragments from polyclonal antibodies against Bungarus fasciatus venoms by chromatography
文章编号:
1673-3851 (2025) 03-0276-07
作者:
李爽; 王炜杰; 赵伟睿; 胡升; 王磊; 范泉水; 吕常江; 黄俊; 梅乐和
1.浙江大学化学工程与生物工程学院，杭州 310027；2.浙大宁波理工学院生物与化学工程学院，宁波 315100；3.浙江健博生物科技股份有限公司，宁波 315602；4.浙江科技大学生物与化学工程学院，杭州 310023；5.金华高等研究院，浙江金华 321019
Author(s):
LI Shuang; WANG Weijie; ZHAO Weirui; HU Sheng; WANG Lei; FAN Quanshui; L  Changjiang;  HUANG Jun; MEI Lehe
1.College of Chemical and Biological Engineering, Zhejiang University, Hangzhou 310027, China; 2.School of Biological and Chemical Engineering, NingboTech University, Ningbo 315100, China; 3.Zhejiang Jianbo Biotechnology Co., Ltd., Ningbo 315602, China; 4.School of Biological and Chemical Engineering, Zhejiang University of Science and Technology, Hangzhou 310023, China; 5.Jinhua Advanced Research Institute, Jinhua 321019, China
关键词:
金环蛇; 多克隆抗体; 胃蛋白酶; F(ab′)2片段; 层析纯化
分类号:
R39233; R392-7
文献标志码:
A
摘要:
为制备高纯度马源金环蛇毒多克隆抗体F(ab′)2，以金环蛇毒高免马血浆为原料，采用Protein G亲和层析捕获马血浆中的IgG，经胃蛋白酶酶解后制得F(ab′)2，分别通过亲和层析、凝胶过滤层析和混合模式层析对F(ab′)2进行精制纯化，并以间接ELISA法测定F(ab′)2对金环蛇毒的中和活性。结果表明：Protein G亲和层析捕获的IgG纯度为83.6%，较传统的盐析纯化法有明显提高；在3种层析精制方法中，通过凝胶过滤层析精制的F(ab′)2纯度最高，为89.3%，远高于《中华人民共和国药典》标准（60%以上），且收率为56.0%；间接ELISA法测定结果显示，F(ab′)2的效价高于1∶4096。该研究为马源抗毒素多克隆抗体F(ab′)2的工业化制备提供了工艺参考。

参考文献/References:

［1］蓝海, 陈远聪. 中国毒蛇及蛇伤救治［M］. 上海: 上海科学技术出版社, 2008: 85-86.
［2］中国蛇伤救治专家共识专家组. 2018年中国蛇伤救治专家共识［J］. 蛇志, 2018, 30(4): 561-567.
［3］Cocchio C, Johnson J, Clifton S. Review of North American pit viper antivenoms［J］. American Journal of Health-System Pharmacy, 2020, 77(3): 175-187.
［4］Chippaux J P. Guidelines for the production, control and regulation of snake antivenom immunoglobulins［J］. Biologie Aujourd’hui, 2010, 204(1): 87-91.
［5］郑颖, 余方芳, 范泉水, 等. 抗金环蛇毒血清生产工艺的研究［J］. 蛇志, 2007, 19(3): 180-183.
［6］Chen S W, Zhang W. Current trends and challenges in the downstream purification of bispecific antibodies［J］. Antibody Therapeutics, 2021, 4(2): 73-88.
［7］Matsuda Y. Current approaches for the purification of antibody-drug conjugates［J］. Journal of Separation Science, 2022, 45(1): 27-37.
［8］Li Y F. Immunoglobulin-binding protein-based affinity chromatography in bispecific antibody purification: functions beyond product capture［J］. Protein Expression and Purification, 2021, 188: 105976.
［9］刘家玮, 唐长伟, 夏一然, 等. 色谱技术在抗体分离纯化中的应用进展［J］. 色谱, 2024, 42(6): 533-543.
［10］Tang S, Tao J L Li Y. Challenges and solutions for the downstream purification of therapeutic proteins［J］. Antibody Therapeutics, 2023, 7(1): 1-12.

相似文献/References:

[1]刘影,陶思锐,舒金琪,等.非洲猪瘟病毒P30蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备[J].浙江理工大学学报,2021,45-46(自科五):691.
　LIU Ying,TAO Sirui,SHU Jinqi,et al.Prokaryotic expression of African swine fever virus P30 protein and preparation of polyclonal antibody[J].Journal of Zhejiang Sci-Tech University,2021,45-46(自科二):691.

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期： 2024-07-31
网络出版日期：2024-09-30
基金项目： 宁波市“科技创新2025”重大专项（2021Z078）；国家自然科学基金项目（31971372, 32371542）
作者简介： 李爽（1999—），男，安徽宿州人，硕士研究生，主要从事抗体纯化方面的研究
通信作者： 梅乐和，E-mail：meilh@zju.edu.cn
更新日期/Last Update: 2025-03-06