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[1]吴海港,饶品彬,蔡晔,等.快速实时荧光定量PCR检测猪繁殖与呼吸综合症病毒方法的建立[J].浙江理工大学学报,2015,33-34(自科2):258-263.
　Design and Implementation of Ammonium Salt Deposition Prediction Software Based on Process Simulation.porcine reproductive and respiratory syndrome virus; TaqMan probe; real time fluorescence quantitative PCR; detection[J].Journal of Zhejiang Sci-Tech University,2015,33-34(自科2):258-263.
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快速实时荧光定量PCR检测猪繁殖与呼吸综合症病毒方法的建立()
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浙江理工大学学报[ISSN:1673-3851/CN:33-1338/TS]

卷:
第33-34卷
期数:
2015年自科2期
页码:
258-263
栏目:
(自科)生物与生命科学
出版日期:
2015-03-10

文章信息/Info

Title:
porcine reproductive and respiratory syndrome virus; TaqMan probe; real time fluorescence quantitative PCR; detection
文章编号:
1673-3851 (2015) 02-0258-06
作者:
吴海港;  饶品彬;  蔡晔;  全滟平;  姜永厚
浙江理工大学生命科学学院, 杭州 310018
Author(s):
Design and Implementation of Ammonium Salt Deposition Prediction Software Based on Process Simulation
OU Guofu, HUANG Kai, WANG Kai, FANG Huaping
关键词:
猪繁殖与呼吸综合症病毒;  TaqMan探针;  实时荧光定量PCR;  检测
分类号:
S852.659.6
文献标志码:
A
摘要:
为建立一种快速准确检测猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)的基于TaqMan实时荧光定量PCR方法,根据猪繁殖与呼吸综合症病毒的ORF7保守序列分别设计引物和TaqMan探针,在常规PCR的基础上,设计并优化基于TaqMan探针的荧光定量PCR检测PRRSV的方法。结果表明本研究建立的基于TaqMan探针的实时荧光定量PCR体系相关系数大于99%,扩增效率为97%,具有良好的线性关系。利用建立的方法检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)、日本脑炎病毒(JEV),结果均为阴性,说明此方法具有较好的特异性。灵敏度试验表明该方法检测极限为5 copies/μL;应用建立的方法对58份血清样本和60份组织样本进行检测,共检测出14份阳性血清和10份阳性组织。这些结果表明本研究建立的基于TaqMan探针的PRRSV实时荧光定量PCR方法具有良好的特异性、灵敏度、重复性,可为临床检测PRRSV提供更高效的技术平台。

参考文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期： 2014-05-20
基金项目： 浙江省自然科学基金项目(Y3090166);国家自然科学基金项目(31101831)
作者简介： 吴海港(1988-),男,浙江绍兴人,硕士研究生,主要从事病毒分子诊断方面的研究
通信作者： 姜永厚,E-mail:yonghoujiang@zstu.edu.cn
更新日期/Last Update: 2015-03-24