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[1]梁彦君,陈文虎,王梦娜,等.PCR结合核酸斑点杂交技术检测转基因番茄研究[J].浙江理工大学学报,2013,30(05):747-752.
 LIANG Yan jun,CHEN Wen hu,WANG Meng na,et al.Research on Detection of Transgenic Tomato with PCR in Combination with Nucleic Acid Spot Hybridization Technology[J].Journal of Zhejiang Sci-Tech University,2013,30(05):747-752.
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PCR结合核酸斑点杂交技术检测转基因番茄研究()
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浙江理工大学学报[ISSN:1673-3851/CN:33-1338/TS]

卷:
第30卷
期数:
2013年05期
页码:
747-752
栏目:
(自科)生物与生命科学
出版日期:
2013-09-10

文章信息/Info

Title:
Research on Detection of Transgenic Tomato with PCR in Combination with Nucleic Acid Spot Hybridization Technology
文章编号:
1673-3851 (2013) 05-0747-06
作者:
梁彦君 陈文虎 王梦娜 许爱霞 冯俊丽
浙江理工大学生命科学学院生物工程研究所, 杭州 310018
Author(s):
LIANG Yan jun CHEN Wen hu WANG Meng na XU Ai xia FENG Jun li
Bioengineering Institute, Zhejiang Sci-Tech University, Hangzhou 310018, China
关键词:
转基因番茄 外源基因检测 定性PCR技术 核酸斑点杂交
分类号:
Q788
文献标志码:
A
摘要:
基于转基因番茄的安全性评价,建立健全番茄转基因检测体系尤为迫切。文章采用转基因作物检测常用的传统定性PCR技术和核酸斑点杂交技术,针对转基因番茄中常用的35S(花椰菜花叶病毒启动子)、NOS(胭脂碱合成酶终止子),NPTII(新霉素转移酶基因),35SEFE(35S和番茄EFE基因的交联结构)、以及Lat52(番茄内参基因),检测了阳性对照质粒PBI121、华蕃一号样品和阴性对照合作903番茄。从华蕃一号中成功检出35S、NOS、NPTII、35SEFE和内参基因Lat52,阴性对照番茄合作903中只有内参基因Lat52检出。试验重复性良好,检测灵敏度高,两种方法相互补充,排除假阳性。核酸斑点杂交一次可检出多个外源基因,增加了检测通量,为我国番茄转基因检测提供参考。

参考文献/References:

[1] Yang L, Shen H, Pan A, et al. Screening and construct specific detection methods of transgenic Huafan No. 1 tomato by conventional and real time PCR[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture, 2005, 85(13): 2159-2166.

[2] Yang L, Pan A, Jia J, et al. Validation of a tomatospecific gene, LAT52, used as an endogenous reference gene in qualitative and realtime quantitative PCR detection of transgenic tomatoes[J]. Agric Food Chem 2005, 53, 183-190.
[3] Xu J, Miao H, Wu H, et al. Screening genetically modified organisms using multiplexPCR coupled with oligonucleotide microarray[J]. Biosensors and Bioelectronics, 2006, 22(1): 71-77.
[4] 刘垣, 郑文杰, 刘伟, 等. 转基因番茄DNA检测芯片的研究[J]. 食品研究与开发, 2005, 26(4): 109-112.
[5] 赵锦, 邓平建, 刘建军, 等. 转基因食品多重定性 PCR 及实时荧光定量 PCR 检测方法的研究[J]. 中国卫生检验杂志, 2004, 14(4): 412-414.
[6] Elenis D S, Kalogianni D P, Glynou K, et al. Advances in molecular techniques for the detection and quantification of genetically modified organisms[J]. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2008, 392(3): 347-354.
[7] Xu C J, Yang L, Chen K S. Development of a rapid, reliable and simple multiplex PCR assay for early detection of transgenic plant materials[J]. Acta Physiologiae Plantarum, 2005, 27(3): 283-288.
[8] Rudi K, Rud I, Holck A. A novel multiplex quantitative DNA array based PCR(MQDA‐PCR) for quantification of transgenic maize in food and feed[J]. Nucleic Acids Research, 2003, 31(11): e62-e62.
[9] Guo J, Yang L, Chen L, et al. MPIC: a high throughput analytical method for multiple DNA targets[J]. Analytical Chemistry Columbus, 2011, 83(5): 1579-1586.
[10] 许小丹, 文思远, 王升启, 等. 检测及鉴定 Roundup Ready 转基因大豆寡核苷酸芯片的制备[J]. 农业生物技术学报, 2005, 13(4): 429-434.
[11] 许爽, 褚云霞, 张辉, 等. 定性PCR技术及卡那霉素对8个番茄品种的转基因检测[J]. 基因组学与应用生物学, 2009, 28(4): 765-769.
[12] 顾晓敏, 黎事伦, 胡良勇, 等. 转基因番茄及其核酸检测技术研究进展[J]. 中国测试, 2009, 35(6): 81-87.
[13] Weng H, Yang L, Liu Z, et al. Novel reference gene, high mobility group protein I/Y, used in qualitative and real time quantitative polymerase chain reaction detection of transgenic rapeseed cultivars[J]. Journal of AOAC International, 2005, 88(2): 577-584.

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期: 2012-11-28
基金项目: 国家质检总局科研项目(2012IK290)
作者简介: 梁彦君(1987-),男,甘肃陇南人,硕士研究生,主要从事植物病毒与天然药物生物反应器。
通信作者: 冯俊丽,电子邮箱:fengjunli0722@yahoo.com.cn
更新日期/Last Update: 2013-10-23