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[1]马清华 徐艳敏 武佳 李伟 钱程 刘立.携带pri-mir-20a的慢病毒表达载体的构建[J].浙江理工大学学报,2010,27(05):814-817.
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携带pri-mir-20a的慢病毒表达载体的构建
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浙江理工大学学报[ISSN:1673-3851/CN:33-1338/TS]

卷:
第27卷
期数:
2010年05期
页码:
814-817
栏目:
出版日期:
2010-10-30

文章信息/Info

作者:
马清华 徐艳敏 武佳 李伟 钱程 刘立
浙江理工大学生命科学学院,杭州,310018
关键词:
pri-mir-20a 慢病毒载体 pdcH1-pri-mir-20a-SEW
摘要:
采用PCR扩增获得的pri-mir-20a,过渡质粒pcDNA3.0-H1经BamH Ⅰ与Hin dⅢ双酶切后将两者连接产生pcDNA3.0-H1-pri-mir-20a重组质粒,再将PCR获得的H1-pri-mir-20a克隆到慢病毒载体pdc-SEW上获得重组慢病毒载体pdcH1-pri-mir-20a-SEW.将pCMV 8.91、pMD2.VSV.G、pdcH1-pri-mir-20a-SEW三质粒共转染293FT细胞,结果显示48 h后绿色荧光蛋白的表达达到80%,表明已成功构建出携带pri-mir-20a的慢病毒表达载体.该载体的成功构建为深入开展对miR-20a的生物学功能和靶标验证提供了有效的工具.

备注/Memo

备注/Memo:
973计划，浙江省"生物医学工程"重中之重学科开放基金
更新日期/Last Update: 2010-10-15