[1]武佳 杨耿兵 李伟 娄文加 马清华 徐艳敏 钱程 刘立.真核生物表达成熟体miR-449a及其生物学活性的研究[J].浙江理工大学学报,2010,27(05):784-788.
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真核生物表达成熟体miR-449a及其生物学活性的研究
浙江理工大学学报[ISSN:1673-3851/CN:33-1338/TS]
- 卷:
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第27卷
- 期数:
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2010年05期
- 页码:
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784-788
- 栏目:
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- 出版日期:
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2010-10-30
文章信息/Info
- 作者:
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武佳 杨耿兵 李伟 娄文加 马清华 徐艳敏 钱程 刘立
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浙江理工大学生命科学学院,杭州,310018
- 关键词:
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pcDNA3.0 miR-449a 人宫颈癌细胞
- 摘要:
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通过分子克隆技术将pre-miR-449a及其上下游200 bp序列克隆至pcDNA3.0多克隆位点,采用脂质体转染该载体至人宫颈癌Hela细胞中,Real-Time PCR检测载体的表达能力,同时使用荧光淬灭法检测表达产生的miRNA的生物学活性.结果表明:转染实验组载体的Hela细胞miR-449a的表达明显升高,而对照组表达几乎无变化,显示真核表达载体pcDNA3.0可以高效表达miRNA;此外,目的质粒与报告质粒共转染Hela细胞后绿色荧光明显淬灭而对照组荧光未淬灭,证明表达的miRNA具有生物学活性.
备注/Memo
- 备注/Memo:
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国家重点基础发展计划973
更新日期/Last Update:
2010-10-15