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[1]南沛,刘高鹏,戴小燕,等.猪流行性腹泻病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立[J].浙江理工大学学报,2021,45-46(自科五):711-716.
　NAN Pei,LIU Gaopeng,DAI Xiaoyan,et al.Establishment of an EvaGreen realtime fluorescence quantitative PCR assay for porcine epidemic diarrhea virus[J].Journal of Zhejiang Sci-Tech University,2021,45-46(自科五):711-716.
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猪流行性腹泻病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立()
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浙江理工大学学报[ISSN:1673-3851/CN:33-1338/TS]

卷:
第45-46卷
期数:
2021年自科第五期
页码:
711-716
栏目:
出版日期:
2021-09-10

文章信息/Info

Title:
Establishment of an EvaGreen realtime fluorescence quantitative PCR assay for porcine epidemic diarrhea virus
文章编号:
1673-3851 (2021) 09-0711-06
作者:
南沛; 刘高鹏; 戴小燕; 姜永厚
浙江理工大学生命科学与医药学院，杭州 310018
Author(s):
NAN Pei; LIU Gaopeng;  DAI Xiaoyan;  JIANG Yonghou
College of Life Sciences and Medicine, Zhejiang Sci-Tech University, Hangzhou 310018, China
关键词:
猪病毒; 腹泻; 实时荧光定量PCR; 熔解曲线分析; 检测
分类号:
S852-65-11
文献标志码:
A
摘要:
为开发一种快速、准确检测猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV）的实时荧光定量PCR方法，根据引物设计原则在病毒基因组序列保守区设计了一对PEDV特异性引物，通过系统优化建立了EvaGreen实时荧光定量PCR方法，对其特异性、灵敏度和重复性进行了分析，并将该方法应用于90份临床样品检测。结果表明：该实时荧光定量PCR可以特异性地检测PEDV，对其他非靶标病毒无交叉反应，最低检测限为5 copies/μL；使用3个不同浓度的标准品进行批内和批间重复，Ct值的变异系数在2-8%以下，表明该方法重复性好；临床样品中PEDV的阳性率为48-9%。建立的实时荧光定量PCR是一种快速、准确、高度灵敏且特异的检测方法，可用于PEDV流行病学调查和临床诊断。

参考文献/References:

［1］ Song D, Park B. Porcine epidemic diarrhoea virus: A comprehensive review of molecular epidemiology, diagnosis, and vaccines［J］. Virus Genes, 2012, 44(2): 167-175.
［2］ Choudhury B, Dastjerdi A, Doyle N, et al. From the field to the lab an European view on the global spread of PEDV［J］. Virus Research, 2016, 226: 40-49.
［3］ Wood E N. An apparently new syndrome of porcine epidemic diarrhoea［J］. The Veterinary record, 1977, 100(12): 243-244.
［4］ Pensaert M B, De Bouck P. A new coronaviruslike particle associated with diarrhea in swine［J］. Archives of Virology, 1978, 58(3): 243-247.
［5］ Debouck P, Pensaert M. Experimental infection of pigs with a new porcine enteric coronavirus, CV 777［J］. American Journal of Veterinary Research, 1980, 41(2): 219-223.
［6］ Kweon C H, Kwon B J, Jung T S, et al. Isolation of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) in Korea［J］. Korea Science, 1993, 33(2): 249-254.
［7］ Stevenson G W, Hoang H, Schwartz K J, et al. Emergence of porcine epidemic diarrhea virus in the United States: Clinical signs, lesions, and viral genomic sequences［J］. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation, 2013, 25(5): 649-654.
［8］ Zhang F, Luo S, Gu J, et al. Prevalence and phylogenetic analysis of porcine diarrhea associated viruses in southern China from 2012 to 2018［J］. BMC Veterinary Research, 2019, 15(1): 470.
［9］ Wang D, Fang L, Xiao S. Porcine epidemic diarrhea in China［J］. Virus Research, 2016, 226: 7-13.
［10］ Lin C M, Saif L J, Marthaler D, et al. Evolution, antigenicity and pathogenicity of global porcine epidemic diarrhea virus strains［J］. Virus Research, 2016, 226: 20-39.

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2021-04-11
网络出版日期：2021-05-25
基金项目：浙江省基础公益研究计划项目 (2018C37051，LGC21C180002)
作者简介：南沛(1995-)，女，山西运城人，硕士研究生，主要从事动物病毒分子诊断方面的研究
通信作者：姜永厚，E-mail: yonghoujiang@zstu.edu.cn
更新日期/Last Update: 2021-09-16