|本期目录/Table of Contents|

[1]王紫凝,高章照,董沁芳,等.猪圆环病毒2型全基因组的克隆及病毒拯救[J].浙江理工大学学报,2018,39-40(自科4):468-473.
　WANG Zining,GAO Zhangzhao,DONG Qinfang,et al.Cloning and virus rescue of full length genome of porcine circovirus type 2[J].Journal of Zhejiang Sci-Tech University,2018,39-40(自科4):468-473.
点击复制

猪圆环病毒2型全基因组的克隆及病毒拯救()
分享到：

浙江理工大学学报[ISSN:1673-3851/CN:33-1338/TS]

卷:
第39-40卷
期数:
2018年自科4期
页码:
468-473
栏目:
出版日期:
2018-07-10

文章信息/Info

Title:
Cloning and virus rescue of full length genome of porcine circovirus type 2
文章编号:
1673-3851 (2018) 07-0468-06
作者:
王紫凝; 高章照; 董沁芳; 全滟平; 姜永厚
浙江理工大学生命科学学院，杭州 310018
Author(s):
WANG Zining;  GAO Zhangzhao;  DONG Qinfang;  QUAN Yanping;  JIANG Yonghou
College of Life Science, Zhejiang Sci-Tech University, Hangzhou 310018, China
关键词:
猪圆环病毒2型; 全长基因组克隆; 细胞转染; 病毒拯救
分类号:
Q939.47
文献标志码:
A
摘要:
为构建猪圆环病毒( Porcine circovirus , PCV) 2型(PCV2)感染性DNA克隆，以淋巴结病料组织中分离的PCV2细胞培养适应毒株为材料，通过基因序列分析比对，在PCV2基因组序列 Xba-Ⅰ酶切位点区设计重叠引物，进行全长扩增并克隆至pMD-18T和pBluescript SK，获得载体pMD-PCV2和pBluescript SK-PCV2。将pMDPCV2重组质粒大量扩增后，用Xba-Ⅰ切出PCV2全基因组，在体外用T4 DNA连接酶使其自环化。通过脂质体法将PCV2自环化产物转染至PK15细胞，并且经15次连续传代，分别用PCR、RT-PCR和间接免疫荧光测定(Indirect immunofluorescence assay, IFA)检测到PCV2的复制、转录和蛋白表达。该研究成功构建具有感染性的PCV2全基因组DNA，为PCV2致病机理和基因功能研究奠定基础。

参考文献/References:

［1］ 殷震,刘景华.动物病毒学［M］.2版.北京:科学出版社,1997：27-30.
［2］ Tischer I, Gelderblom H, Vetteermann W, et al. A very small porcine virus with circular single stranded DNA［J］. Nature,1982,295(7):64-66.
［3］ Allan G M and Ellis J A. Porcine circoviruses: A review［J］. Journal of Veterinary Diagnistic Investigation,2000,12(1):3-14.
［4］ Opriessnig T, Meng X J and Halbur P G. Porcine circovirus type 2 associated disease: Update on current terminology, clinical manifestations, pathogenesis, diagnosis, and intervention strategies［J］. Journal of Veterinary Diagnistic Investigation,2007,19(6):591-615.
［5］ Palinski R, Pineyro P, Shang P, et al. A novel porcine circovirus distantly related to known circoviruses is associated with porcine dermatitis and nephropathy syndrome and reproductive failure［J］. Journal of Virology,2016,91(1):e01879-16.
［6］ Allan G, Meehan B, Todd D, et al. Novel porcine circovirus from pigs with wasting disease syndromes［J］. Veterinary Record,1998,142(17):467-468.
［7］ Morozov I, Sirinarumitr T, Sorden S, et al. Detection of a novel strain of porcine circovirus in pigs with postweaning multisystemic wasting syndoome［J］. Journal of Clinical Microbiology,1998,36(9):2535-2541.
［8］ Hamel A, Lin L, Nayar G P. Nucleotied sequence of porcine circovirus associated with postweaning multisystemic wasting syndrorne in pigs［J］. Journal of Virology,1998,72(6):5262-5267.
［9］ Allan G M, Ellis J A. Porcine circoviruses: A review［J］. Journal of Veterinary Diagnistic Investigation,2000,12(1):3-14.
［10］ Segalés J, Allan G M, Domingo M. Porcine circovirus diseases［J］. Animal Health Research Reviews,2005,6(2):119-142.

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期： 2017-12-26
网络出版日期： 2018-04-08
基金项目： 浙江省自然科学基金项目(LY15C010006)；浙江省科技厅项目(2018C37051)；国家自然科学基金项目(31101831)
作者简介： 王紫凝(1992-)，女，安徽蚌埠人，硕士研究生，主要从事猪圆环病毒分子生物学研究
通信作者： 姜永厚，E-mail：yonghoujiang@zstu.edu.cn
更新日期/Last Update: 2018-09-10