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[1]武佳 杨耿兵 李伟 娄文加 马清华 徐艳敏 钱程 刘立.真核生物表达成熟体miR-449a及其生物学活性的研究[J].浙江理工大学学报,2010,27(05):784-788.
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真核生物表达成熟体miR-449a及其生物学活性的研究
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浙江理工大学学报[ISSN:1673-3851/CN:33-1338/TS]

卷:
第27卷
期数:
2010年05期
页码:
784-788
栏目:
出版日期:
2010-10-30

文章信息/Info

作者:
武佳 杨耿兵 李伟 娄文加 马清华 徐艳敏 钱程 刘立
浙江理工大学生命科学学院,杭州,310018
关键词:
pcDNA3.0 miR-449a 人宫颈癌细胞
摘要:
通过分子克隆技术将pre-miR-449a及其上下游200 bp序列克隆至pcDNA3.0多克隆位点,采用脂质体转染该载体至人宫颈癌Hela细胞中,Real-Time PCR检测载体的表达能力,同时使用荧光淬灭法检测表达产生的miRNA的生物学活性.结果表明:转染实验组载体的Hela细胞miR-449a的表达明显升高,而对照组表达几乎无变化,显示真核表达载体pcDNA3.0可以高效表达miRNA;此外,目的质粒与报告质粒共转染Hela细胞后绿色荧光明显淬灭而对照组荧光未淬灭,证明表达的miRNA具有生物学活性.

备注/Memo

备注/Memo:
国家重点基础发展计划973
更新日期/Last Update: 2010-10-15